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水質糞大腸菌群檢驗紙片
水質糞大腸菌群檢驗紙片

產品編號:BD105Ⅰ、Ⅱ
產品規格:1份/包(15片)
保質期:冷藏 1年
產品用途: 適用于湖水、水源水中大腸菌群的快速檢測。
其它相關:水質糞大腸菌群檢驗紙片

產品說明

 

BD105Ⅰ 水質(糞)大腸菌群快速檢驗紙片 1份/包 適用于湖水、水源水中大腸菌群的快速檢測。

BD105Ⅱ 水質(糞)大腸菌群快速檢驗紙片 1份/包 適用于河水、生活用水、醫療機構處理后排污水、禽畜養殖業等排放廢水中大腸菌群的快速檢測。
 
分BD105Ⅰ和BD105Ⅱ兩個型號,請注意選擇型號。
 
1、適用范圍 水質(糞)大腸菌群的測定 紙片快速法
 
本標準適用于地表水、生活污水、醫療機構及禽畜養殖業等其他行業排放的廢水中(糞)大腸菌群的快速篩查。
本方法的檢出限為20MPN/L。
 
2、規范性引用文件
本標準內容引用了下列文件或其中的條款。凡是不注明日期的引用文件,其有效版本適用于本標準。HJ/T91地表水和污水監測技術規范
 
3、術語和定義
下列術語和定義適用于本標準。
 
3.1總大腸菌群(total coliforms)
在37℃培養,24h內能發酵乳糖酸產氣的需氧及兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。
 
3.2 糞大腸菌群(fecal coliforms)
44.5℃培養,24h內能發酵乳糖產酸氣的總大腸菌群,屬糞行來源,稱為糞大腸菌群。
 
4、方法原理
將一定量的乳糖、指示劑(溴甲酚紫和2,3, 5-氯化三苯基四氮唑即TTC)以及營養成分等吸附于一定面積的無菌濾紙上,當細菌生長繁殖時,產酸使PH值降低,溴甲酚紫指示劑由紫色變黃色。同時,產氣過程相應的脫氫酶在適宜的PH范圍內,催化底物脫氫還原TTC形成紅色的不溶性三苯甲臜(TTF),即可在產酸后的黃色背景下顯示出紅色斑點(或紅暈)。通過上述指示劑的顏色變化就可對是否產酸產氣作出判斷,從而確定是否有(糞)大腸菌群存在,再通過查MPN表就可得出相應(糞)大腸菌群的濃度值。
 
5、試劑和材料
除非另有說明,分析時均使用符合國家標準的分析純化學試劑。
 
5.1市售水質總大腸菌群、糞大腸菌群測試片:10ml水樣量紙片按附錄A的方法進行質量鑒定,達到要求后方可使用。
 
5.2無菌水
用新制備的去離子水或蒸餾水,按無菌操作要求,121℃高壓蒸汽滅菌20min,備用。
 
5.3硫代硫酸鈉溶液:ρ(Na2S2O3)=0.10g/ml
稱取硫代硫酸鈉10g,溶于適量蒸餾水(或去離子)中,稀釋至100ml,現配。
 
5.4乙二胺四乙酸二鈉(EDTA- Na2)溶液:ρ(C10H14N2O8Na2。 2H2O)=0.15g/ml
稱取EDTA-Na2 15g,溶于適量蒸餾水(或去離子水)中,稀釋至100ml,此溶液保質期為30d。
 
6、儀器和設備
6.1 恒溫培養箱:37℃±1℃。
6.2 恒溫培養箱:44℃±0.5℃。
6.3 高壓蒸汽滅菌器:121℃、101.3kpa。
6.4 冰箱:0-4℃
6.5 移液管:1±0.01ml、10±0.1ml。
6.6 試管:φ15mm×150mm.
6.7 采樣瓶:500ml。
注1:移液器、試管、采樣瓶等玻璃器皿實驗前要按無菌操作要求包扎,121℃高壓蒸汽滅菌20min,烘干,備用。
 
 
7、樣品
用滅菌器具,按照HJ/T 91的規定及無菌操作的要求,采集水樣400ml放入已滅菌的采樣瓶中。如果是經加氯處理的廢水,需在采樣瓶滅菌前加入乙二胺四乙酸二鈉(EDTA- Na2)溶液(5.4)1.2ml,以消除干擾。酸性樣品,需調節胖胖的PH值至7.0-8.0。
采樣后2h內檢測,否則,需10℃以下冷藏并6h內送檢,實驗室接樣后,應將樣品放入0-4℃冰箱并2h內測定。
注2:10mg硫代硫酸鈉可保證去除水樣中1.5mg余氯,硫代硫酸鈉用量克根據水樣實際余氯量調整。
 
8、分析步驟
8.1接種量
每個樣品按三個不同的接種量接種,每個接種量分別接種5張紙片,共接種15張紙片。
根據水樣的污染程度確定接種量,應盡可能使5個接種量最大的紙片為陽性、5個接種量最小的紙片為陰性。
 
清潔水樣的參考接種量分別為10 ml、1 ml、0.1 ml,受污染水樣參考接種量根據污染程度可接種1 ml、0.1ml、0.01 ml或0.1 ml、0.01 ml、0.001 ml等。
 
接種量小于1ml時,水樣應制成稀釋樣品后使用。接種量為0.1ml、0.01 ml時,分別制成1:10稀釋樣品、1:100稀釋樣品。其它接種量的稀釋樣品依次類推。
1:10稀釋樣品的制作方法為:吸取1ml水樣,注入盛有9 ml無菌水的試管中,混勻,制成1:10稀釋樣品。其它稀釋度的稀釋樣品同法制作。
 
8.2接種、培養
水樣充分混勻,按無菌操作制作稀釋水樣及接種水樣。
清潔水樣,接種水樣總量為55.5ml,10 ml水樣量紙片5張,每張接種水樣10ml,1 ml水樣量紙片10張,其中5張各接種水樣1ml,另5張各接種1:10的稀釋水樣1ml。受污染水樣,接種3個不同稀釋度的1ml稀釋水樣各5張。
接種水樣應均勻涂布于紙片上,紙片充分侵潤、吸收水樣,用手輕輕壓平,做好標記。
 
測總大腸菌群時,在37±1℃的條件下培養18-24h后觀察結果;測糞大腸菌群時,在44.5±0.5℃的條件下培養18-24h后觀察結果。
 
注3:
1、檢測糞大腸菌群時,紙片接種后應立即放置于44.5±0.5℃的恒溫培養箱中培養,在常溫下放置過久將影響檢測結果的準確性。
2、紙片加入水樣后,短時間內變黃或退色,表明水樣存在酸性物質活氧化劑干擾,需按“7樣品”一節方法去除相應干擾。
 
9、結果判定
(1)紙片上出現紅斑或紅暈且周圍變黃,為陽性。
(2)紙片全片變黃,無紅斑或紅暈,為陽性。
(3)紙片部分變黃,無紅斑或紅暈,為陰性。
(4)紙片的紫色背景上出現紅斑或紅暈,而周圍不變黃,為陰性。
(5)紙片無變化,為陰性。
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