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糞鏈球菌檢測板
糞鏈球菌檢測板

產品編號:32.8033
產品規格:5片/包 (4包一盒,20片)
接種數量:1ml/片
保存期限:12個月
產品用途:適合于生活飲用水、生產加工用水及食品中糞鏈球菌的測定。

產品說明

 

1、原理及適用范圍

糞鏈球菌普遍存在于水環境中,為條件致病菌,它來源于人和溫血動物的糞便,可以在水中存活很長時間,引起人類疾病。是水體受到糞便污染的重要指標菌,更能客觀的反映水質衛生狀況。中華人民共和國城鎮建設標準在對城市供水、飲用水水質監測中增加了水中糞鏈球菌的檢測指標。糞鏈球菌檢測板是一種預先制備好的一次性培養基產品,含有標準的營養培養基,冷水可溶性的吸水凝膠和脫氫酶指示劑氯化三苯基四氮唑(TTC),菌落在檢測板上呈紅色帶黃暈斑點。本產品適合于生活飲用水、生產加工用水及食品中糞鏈球菌的測定。                 

執行標準:中華人民共和國國家標準《飲用天然礦泉水檢驗方法》(GB/T 8538);中華人民共和國進出口商品檢驗行業標準出口商品中糞鏈球菌群檢驗SN/T 0475)。

 

2、操作方法

2.1水樣品檢測

2.1.1 水樣過濾:將滅菌的過濾裝置連接到抽濾瓶上,用滅菌鑷子夾取直徑47 mm50 mm,孔徑為0.45μm的滅菌濾膜,放在濾器底部,旋緊蓋子,將250 mL水樣注入濾器中抽濾。

2.1.2  揭開檢測板上層膜,在檢測板紙片上加1 mL無菌水濕潤后,迅速用無菌鑷子將過濾水樣的濾膜移放在檢測板紙片上(濾膜截留細菌面向上),濾膜與紙片之間不要夾留著氣泡,貼好上層膜

2.2食品樣品檢測

2.2.1  25 g25 mL樣品放入裝有225 mL生理鹽水的均質袋中,以8000 r/min均質12 min,制成1:10樣品均液,根據樣品污染程度及檢驗需要,可進一步制成10倍遞增的樣品稀釋液。

2.2.2 將糞鏈球菌檢測板上層膜不干膠標簽部分揭開,用無菌吸管吸取1 mL樣品稀釋液均勻滴加到紙片上,迅速貼好上層膜并水平晃動檢測板,靜置10 s左右,待樣品稀釋液完全被吸附在濾紙上。每個稀釋度接種兩個檢測板作為重復

2.3 培養:將檢測板疊在一起,倒置于恒溫培養箱內,36±1℃,培養1524 h

 

3、結果判讀

在檢測板(濾膜)上生長的紅色帶黃暈的斑點即為糞鏈球菌陽性,若紙片上的紅色斑點無黃暈則為糞鏈球菌陰性。

糞鏈球菌檢測板結果對照 

 

4、計數原則及報告方式

4.1  濾膜過濾水樣:以濾過一張無菌濾膜后產生的菌落數計算,選擇菌落數在20100CFU的檢測板進行計數后即為250 mL水樣品中所含的菌落總數。結果以CFU/250 mL為單位報告。

4.2 食品樣品計數

4.2.1 以生長有30300CFU的檢測板為計數適宜范圍。

4.2.2 若只有一個稀釋度檢測板上的菌落數在計數合適范圍30300CFU之間,則計算兩個檢測板菌落數的平均值,再除以相應的稀釋倍數,作為每克(毫升)中菌落總數結果。

4.2.3 若有兩個連續稀釋度在適宜計數范圍內時,按式(1)計算:

                        ∑C

               N= ————————     •••••••••••••••••••1

                   (n1+0.1n2d

   式中:

   N——樣品中糞鏈球菌菌落數;

   ∑C——兩個連續稀釋度檢測板(含適宜范圍菌落數的檢測板)糞鏈球菌菌落之和;

   n1——適宜范圍菌落數的第一個稀釋度(低)檢測板個數

   n2——適宜范圍菌落數的第二個稀釋度(高)檢測板個數

   d——第一稀釋度的稀釋倍數

 示例:

稀釋度

1:10(第一個稀釋度)

1:100(第二個稀釋度)

菌落數

245247

3130

 

                   (245+247+31+30

               N= —————————— =2514

                  (2+0.1×2)×10-1

結果表述為2.5×103CFU/g(ml)

4.2.4 若所有稀釋度檢測板上均無菌落生長,則以小于1/dd—最低稀釋倍數)計算。

4.2.5低數值的估算:如果實驗樣品原液(水及液體飲料)或初始稀釋懸液(其他樣品)的兩個檢測板上的菌落數均小于30CFU,計算兩個檢測板上的菌落數的平均數。計算式(2):

                    ∑C

                  NE = ——    •••••••••••••••••••2

                        nd

式中

NE——每毫升或每克樣品中菌數的估算值;

C——兩個檢測板上菌落數的和;

n——檢測板的數量;

d——樣品初始懸液或實際接種懸液的稀釋倍數。

4.2.6大數值的估算:若所有稀釋度的檢測板上菌落數均大于300CFU,計數最接近300CFU檢測板上的菌落并計算出平均數,其他檢測板可記錄為多不可計。結果計算式(3):

                        ∑C

                  NE = ——   •••••••••••••••••••3

                        nd

式中

NE——每毫升或每克樣品中菌數的估算值;

C——兩個檢測板上菌落數之和;

n——檢測板的數量;

d——與樣品懸液相一致的稀釋倍數。

 

5、結果報告

固體樣品以CFU/g為單位報告,液體樣品以CFU/mL為單位報告。

 

6、附加說明

    注意使用過的檢測板上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。

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