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菌落總數檢測板
菌落總數檢測板

產品編號:32.8027
產品規格:5片/包 (4包一盒,20片)
接種數量:1ml/片
保存期限:12個月
產品用途:適合于各類食品及食品原料中菌落總數的測定。

產品說明

 

1、原理及適用范圍

    菌落總數是指樣品經過處理,在一定條件下培養后所得1 mLg)檢樣或單位面積樣品中所含菌落的總數,是最常用的微生物檢測項目。菌落總數檢測板是一種預先制備好的一次性培養基產品,含有標準的營養培養基,吸水凝膠和脫氫酶指示劑氯化三苯基四氮唑(TTC),菌落在檢測板上呈紅色,這樣可縮短計數時間和增強計數效果。本產品適合于各類食品及食品原料中菌落總數的測定。執行標準:《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數測定》(GB 4789.2)。

 

2、操作方法

2.1  樣品處理:取樣品 25 mLg)放入含有225 mL滅菌磷酸緩沖稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質袋內,制成1:10的樣品勻液,必要時用1 mol/LNaOH1mol/L HCl溶液調節樣品勻液pH6.67.21mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1 mL,注入含有9 mL稀釋液的試管內,振搖后成為1:100的樣品勻液,以此類推,做出1:1000等稀釋度的樣品勻液,每次換一支吸管。

2.2  接種:一般食品選23個稀釋度進行檢測,含菌量少的液體樣品(如飲用純水和礦泉水等)可直接吸取原液進行檢測。將菌落總數檢測板置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1 mL樣品勻液滴加到檢測板內,迅速貼好上層膜并水平晃動檢測板,讓樣品勻液均勻吸附在濾紙上,靜置10s左右,待樣品勻液完全被吸附在濾紙上。每個稀釋度接種兩片。同時做一片空白陰性對照。

2.3  培養:將檢測板疊在一起,倒置于恒溫培養箱內。一般食品培養溫度為36℃±1℃,培養1524 h;水產品培養溫度為30±1℃,培養48 h

 

3、結果判讀

     細菌在檢測板上生長后會顯示紅色斑點,選擇菌落數適中(30300 CFU)的檢測板進行計數,乘以稀釋倍數后即為每毫升(或每克)樣品中所含的細菌菌落總數。

 菌落總數檢測板結果對照 

 

4、計數原則及報告方式

4.1  若只有一個稀釋度檢測板上的菌落數在適宜計數范圍內,計算兩個檢測板菌落數的平均值,再將平均值乘以相應稀釋倍數,作為每克(或毫升)樣品中菌落總數結果。

4.2  若有兩個連續稀釋度的檢測板菌落數在適宜計數范圍內時,按式(1)計算

                                ················ (1

    式中:

    N——樣品中菌落數;

    C——檢測板上(含適宜范圍菌落數的測試片)菌落數之和;

    n1——第一稀釋度(低稀釋倍數)檢測板數;

    n2——第二稀釋度(高稀釋倍數)檢測板數;

d——稀釋因子(第一稀釋度)

示例:

稀釋度

1100(第一稀釋度)

11000(第二稀釋度)

菌落數

232244

3335

上述數據經“四舍五入”后,表示250002.5×104

 

4.3  若所有的稀釋度菌落總數均大于300 CFU,則對稀釋度最高的檢測板進行計數,其他檢測板可記錄為多不可計,結果按平均菌落數乘以最高稀釋倍數計算。

4.4  若所有的稀釋度菌落總數均小于30 CFU,則應按稀釋度最低的平均菌落數乘以稀釋倍數計算。

4.5 若所有的稀釋度(包括液體樣品原液)均無菌落生長,則以小于1乘以最低稀釋倍數計算。

4.6  若所有稀釋度的平均菌落數均不在30 CFU300 CFU之間,其中一部分小于30 CFU或大于300CFU,則以最接近30 CFU300 CFU的平均菌落數乘以稀釋倍數計算。

 

4.7 菌落總數的報告

4.7.1 菌落總數在100 CFU以內時,按“四舍五入”原則修約,采用兩位有效數字報告。

4.7.2 大于或等于100 CFU時,第三位數字采用“四舍五入”原則修約后,取前兩位數字,后面的0代替位數,也可用指數形式來表示,按“四舍五入”原則修約后,采用兩位有效數字。

4.7.3 若測試片上一片紅色無法計數時,則報告多不可計。

4.7.4 若空白對照上有菌落生長,則此次檢測結果無效。

4.7.5 固體樣品以CFU/g為單位報告,液體樣品以CFU/mL為單位報告。

 

5、附加說明

5.1  菌落總數檢測板檢測結果與傳統平板計數瓊脂平板法符合率可達90%以上。

5.2  磷酸緩沖液稀釋液的配制與滅菌:貯存液:稱取34.0 g分析純磷酸二氫鉀(KH2PO4)溶于500 mL蒸餾水或純凈水中,用大約175 mL1 mol/L氫氧化鈉(NaOH)溶液調節PH7.2,用蒸餾水稀釋至1000 mL后貯存于冰箱。稀釋液:取貯存液1.25 mL,用蒸餾水稀釋至1000 mL,分裝于適宜容器中,121℃高壓滅菌15 min,或放入消毒碗柜中消毒。

5.3 生理鹽水的配制與滅菌:取8.5 g分析純氯化鈉(NaCl)溶解到1000 mL蒸餾水或純凈水中,分裝于適宜容器中,121℃高壓滅菌15 min,或放入消毒碗柜中消毒。

5.4 注意使用過的檢測板上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。

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